PCR擴(kuò)增中的氣溶膠污染一般指的是DNA/RNA氣溶膠污染,是實(shí)驗(yàn)室中極易出現(xiàn)的一種空氣污染。比如離心機(jī)離心、反應(yīng)管劇烈搖動(dòng)、PCR產(chǎn)物開(kāi)蓋和移液器反復(fù)吸樣時(shí),均會(huì)產(chǎn)生游離于空氣中的小片段核酸,當(dāng)它們附著在空氣中的塵埃上時(shí),就形成了我們常說(shuō)的核酸氣溶膠。
如果已經(jīng)排除了體系污染和樣品間交叉污染,但是以去離子水為模板依然可以擴(kuò)增出目的條帶,那就很有可能存在氣溶膠污染了哦。如果出現(xiàn)這類(lèi)PCR擴(kuò)增假陽(yáng)性的話(huà),就無(wú)法得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果啦!
為了消滅氣溶膠污染
我們可以做兩方面努力:
1、消除PCR污染;
2、長(zhǎng)期維護(hù)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境整潔。
1-消除PCR污染措施
擴(kuò)增后的PCR產(chǎn)物避免開(kāi)管,若要開(kāi)管操作盡量遠(yuǎn)離PCR試劑配置區(qū)域,若條件允許盡量處于不同樓層,開(kāi)管操作后身上的操作服和手套等盡量避免穿到試劑配置區(qū)域;
PCR產(chǎn)物及時(shí)清理,避免長(zhǎng)期在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)堆積;
更換新的試劑和耗材,如引物、酶、去離子水和EP管等;
更換PCR擴(kuò)增區(qū)域,設(shè)計(jì)引物時(shí)特意將引物的擴(kuò)增區(qū)域和已經(jīng)發(fā)生污染的片段區(qū)別開(kāi),可消除當(dāng)前已發(fā)生的PCR氣溶膠污染問(wèn)題。
2-實(shí)驗(yàn)室環(huán)境維護(hù)方面
保持良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣:在PCR實(shí)驗(yàn)前,使用75%乙醇擦拭桌面和移液器;DNA提取、引物溶解、PCR體系配置時(shí),盡量避免劇烈震蕩,輕柔開(kāi)合EP管;如發(fā)生樣品飛濺時(shí),使用75%乙醇至少擦拭桌面兩次;
控制實(shí)驗(yàn)室環(huán)境:保持每天至少4個(gè)小時(shí)的通風(fēng)(氣溶膠污染尤其高發(fā)在冬夏開(kāi)空調(diào)時(shí)期);
紫外照射:常規(guī)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,可設(shè)置紫外定時(shí)照射,每天照射2h,并注意開(kāi)窗通風(fēng)以避免富集臭氧。
鯤鵬基因Archimed 系列
熒光定量PCR儀
Archimed 系列熒光定量PCR儀是鯤鵬基因汲取定量PCR技術(shù)發(fā)展之精華,由國(guó)際化資深技術(shù)團(tuán)隊(duì)匠心打造的全球首款時(shí)間分辨實(shí)時(shí)熒光定PCR系統(tǒng)?;诜颇鶢柾哥R的新型光路系統(tǒng)、專(zhuān)利的時(shí)間分辨信號(hào)采集技術(shù)及獨(dú)特的控溫技術(shù),使Archimed具備更高的檢測(cè)靈敏度、更卓越的溫控準(zhǔn)確性和均一性、更便捷的操作流程,以及更全面的分析功能。同時(shí),基于全球視野的產(chǎn)品設(shè)計(jì)理念及制造工藝,賦予Archimed國(guó)際水準(zhǔn)的優(yōu)異品質(zhì)。
關(guān)于鯤鵬基因
鯤鵬基因(北京)科學(xué)儀器有限公司(以下簡(jiǎn)稱(chēng)鯤鵬基因)成立于2016年,是由科學(xué)家和商業(yè)人士創(chuàng)立、由核心技術(shù)驅(qū)動(dòng)的生物高科技公司。鯤鵬基因致力于將生命科學(xué)研究領(lǐng)域的新技術(shù)轉(zhuǎn)化為與臨床相關(guān)的醫(yī)學(xué)研究產(chǎn)品,開(kāi)發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的科研與分子診斷產(chǎn)品。
鯤鵬基因先后榮獲“國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)”、北京市“專(zhuān)精特新”中小企業(yè)、“中關(guān)村高新技術(shù)企業(yè)”等多項(xiàng)榮譽(yù)稱(chēng)號(hào)。目前已獲得中國(guó)三類(lèi)醫(yī)療器械注冊(cè)證4項(xiàng)、一類(lèi)醫(yī)療器械備案17項(xiàng),同時(shí)獲得CE認(rèn)證30項(xiàng)、美國(guó)FDA認(rèn)證4項(xiàng)、英國(guó)MHRA認(rèn)證4項(xiàng)、印尼NADFC認(rèn)證3項(xiàng)。已取得專(zhuān)利67項(xiàng):其中發(fā)明專(zhuān)利41項(xiàng),實(shí)用新型專(zhuān)利12項(xiàng),外觀專(zhuān)利14項(xiàng);取得軟件著作權(quán)證47項(xiàng)。截至目前,鯤鵬基因的產(chǎn)品先后出口到世界上近20個(gè)國(guó)家。
鯤鵬基因于2023年7月搬遷至北京總部大樓,擁有超10000㎡的研發(fā)運(yùn)營(yíng)中心,擁有標(biāo)準(zhǔn)化研發(fā)實(shí)驗(yàn)室。徐州子公司擁有超10000㎡的生產(chǎn)智造中心,擁有標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)車(chē)間,包括4條儀器生產(chǎn)線和3條試劑生產(chǎn)線。已通過(guò)ISO13485和IS9001質(zhì)量管理體系認(rèn)證,并持續(xù)提升質(zhì)量管理水平。
鯤鵬基因秉承自我超越的勇氣,九萬(wàn)里的豪氣,立志成為具有前瞻眼光的行業(yè)領(lǐng)航者。
鯤鵬基因系列產(chǎn)品